你知道在細胞培養(yǎng)實驗中該如何避免污染嗎?讓我們一起來看看吧!
一、培養(yǎng)環(huán)境:
1)無菌室:保持清潔,經(jīng)常擦洗,使污染物不易積聚。
2)超凈臺:
①定期維護和保養(yǎng),按廠家規(guī)定定期清洗和更換空氣濾器,經(jīng)常保持清潔并用75%乙醇消毒;
②操作前提前30 min啟動超凈臺紫外燈消毒;
③存放的物品應(yīng)全面消毒,并盡可能只將立即使用的物品放入;
④細胞培養(yǎng)操作時應(yīng)盡量保持層流,避免氣霧狀污染物進入培養(yǎng)器皿;
⑤操作中濺出的液體應(yīng)及時擦去,并用75%乙醇擦拭消毒;
⑥實驗完畢后,移走所有物品,并用75%乙醇擦洗工作臺。
二、物品的消毒滅菌
①操作前應(yīng)做好所用器皿、試劑的消毒滅菌工作;
②高壓蒸汽滅菌是常用的方法,不能采用此法滅菌的器皿、試劑,應(yīng)采用其他消毒滅菌方法,如培養(yǎng)基等試劑可過濾除菌,蓋玻片等器械可用75%乙醇浸泡消毒后置于無菌環(huán)境中晾干;
③若物品消毒滅菌后長時間未使用,應(yīng)重新處理。
三、無菌操作
防止污染的關(guān)鍵在于嚴格無菌操作。無菌意識不強、動作不準確、操作不熟練等都會造成污染。注意事項主要如下:
①細胞培養(yǎng)的操作一定要在超凈臺等層流裝置內(nèi)進行,無菌的試劑、器械一定要在無菌區(qū)開封;
②操作時減少交談、咳嗽等防止來自唾沫和呼出氣流造成的污染;
③培養(yǎng)試劑不宜過早開瓶,操作時應(yīng)盡可能保持瓶體傾斜,所有瓶口不能與超凈臺的風向相逆,使用后應(yīng)立即封閉瓶口;
④培養(yǎng)的細胞處理前也不要過早暴露于空氣中;
⑤不要在打開器皿上方操作;
⑥不允許用手觸及器皿的無菌部分(如瓶口、瓶蓋內(nèi)側(cè))。
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