親和色譜(Affinity chromatography,又稱為親和層析)是一種利用固定相的結合特性來分離分子的色譜方法。親和色譜在凝膠過濾色譜柱上連接與待分離的物質有一定結合能力的分子,并且這種結合是可逆的,在改變流動相條件時二者還能相互分離。親和色譜可以用來從混合物中純化或濃縮某一分子,也可以用來去除或減少混合物中某一分子的含量。
親和色譜具有高選擇性,而且能有效地保持生物大分子高級結構的穩(wěn)定性,同時還具有對活性樣品高回收率的特點,所以親和色譜可以用來從細胞提取物中分離純化核酸、蛋白質,還可以從血漿中分離抗體。分離重組蛋白就經(jīng)常使用親和色譜。
BioToolomics開發(fā)了多種親和層析填料,比如谷胱GAN肽親和層析填料、蛋白A親和層析填料、蛋白G親和層析填料、鈷親和層析填料、鎳親和層析填料和肝素親和層析填料等。
谷胱GAN肽親和層析填料(Glutathione SepFast)是一種用于快速純化谷胱GAN肽s -轉移酶(GST)標記蛋白的親和層析填料,可以快速純化細菌、酵母、昆蟲和哺乳動物細胞培養(yǎng)物中表達的GST標記蛋白。
蛋白A親和層析填料和蛋白G親和層析填料是一種用于純化免疫球蛋白的親和層析介質,可以用于從生物體液和細胞培養(yǎng)基中分離和純化免疫球蛋白的類別、亞類和片段:
·Protein A SepFast Large Bead和Protein G SepFast Large Bead,粒徑:150 - 350µm,特別適合處理粘性或含細胞的原料(即高沉降率和極低的柱壓);
·Protein A SepFast HighRes和Protein G SepFast HighRes,粒徑:20 – 50 µm,適合小柱運行,停留時間短(即較高的流速);
·Protein A SepFast和Protein G SepFast,粒徑:50 – 150 µm,適用于大多數(shù)從小規(guī)模到大規(guī)模的純化需求(即低柱壓);
固定化金屬親和色譜 (IMAC) 基于某些過渡金屬離子(主要是Ni2+、Zn2+和Co2+)與含有組AN酸(或半胱AN酸和色AN酸)的暴露氨基酸表面鏈之間的特定相互作用。IMAC用于純化在細菌、酵母和哺乳動物細胞中表達的帶組AN酸標簽的重組蛋白,還可用于純化某些天然的非標記蛋白質,例如干擾素、凝集素、抗體、血清和血漿蛋白、肽和肽激素。IMAC SepFast或其三種帶金屬電荷的形式(Ni SepFast、Co SepFast和Zn SepFast),具有高度穩(wěn)定性并與蛋白質純化過程中常用的多種化學品(例如去垢劑、變性試劑和還原劑等)兼容。
肝素親和層析填料(Heparin SepFast)用于純化對肝素有親和力的生物分子,如抗凝XUE酶III、凝XUE因子和其他血漿蛋白、DNA 結合蛋白、脂蛋白、蛋白質合成因子、作用于核酸的酶和類固醇受體等。
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